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Artículos de salud para pacientes

Pruebas diagnósticas para influenza

El diagnóstico de influenza se fundamenta en el diagnóstico clínico (historia clínica y exámen físico). Las pruebas de laboratorio juegan también un papel importante  en el diagnóstico y tratamiento. El aislamiento viral o la detección del antígeno viral en las secreciones respiratorias son las técnicas de mayor utilidad en la etapa aguda de la enfermedad.

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El virus puede ser detectado a través de muestras tomadas  en mucosas  de nariz o garganta (hisopado nasofaríngeo), esputo,  por diferentes técnicas. El diagnóstico rápido de la infección mediante estudio de inmunofluorescencia o identificación inmunoenzimático (ELISA)del antígeno viral en células epiteliales de las secreciones del tracto respiratorio, no arrojan ninguna información acerca de los subtipos virales. Estos test rápidos tienen una gran utilidad en la atención primaria del paciente, dada por el médico general o por centros que tienen que descartar la enfermedad viral en grandes grupos poblacionales, como está sucediendo en estos momentos.

El uso racional de los test rápidos es de utilidad para iniciar el tratamiento antiviral con inhibidores neuraminidasa, el cual debería ser instaurado dentro de las primeras 48 horas de iniciado la enfermedad, para que no pierda su eficacia, la cual es disminuir el tiempo de la enfermedad. Ejemplos de estas pruebas son: FLU OIA y QUICKVUE Influenza test son basados en la detección del antígeno viral usando anticuerpos monoclonal. Ahora hay pruebas más modernas de tercera generación ( ZSTATFLU) basado en la detección de la neuraminidasa viral. Otros métodos rápidos (< 30 minutos ) DIRECTIGEN  A, de hisopado de nasofaríngeo, faríngeo, nasal.  Las pruebas por Inmunofluorescencia demoran entre 2 y 4 horas  y las pruebas por ELISA identificación inmunoenzimática de la enfermedad, mediante la toma de muestras de hisopado nasofaríngeo, nasal y lavado bronquial, demoran 2 horas. 

Los diagnósticos serológico (en sangre), son de enorme utilidad desde el punto de vista epidemiológico y mide los títulos de anticuerpo inhibidores de la hemaglutininación  en sangre(IHA), inmunoanálisis  enzimático (ELISA), estos títulos tienen que estar aumentados 4 veces su valor referencial, no son pruebas rápidas, se positivizan a los  10- 14 días (2 semanas).

El cultivo viral de muestras de hisopado nasofaríngeo, esputo y lavado bronquial, requiere de un laboratorio especializado y demora una semana (5-10días). La línea celular preferida para el cultivo celular de influenza es la MDCK (Madin Darby Canine Kidney), este medio nutritivo debe contener tripsina. Luego se puede realizar la tipificación del virus (determinación del subtipo) por análisis antigénico de su Hemaglutinina HA.

Otro método clásico de aislamiento del virus es en huevos embrionados de gallina de 9-10 días de incubación, los virus de la influenza se propagan exitosamente bien en huevos embrionados inoculados en la cavidad amniótica (por trans iluminación)y/o alantoides incubados a 33° C durante 76 a 96 horas.

PCR y LA PCR-RT l (reacción en cadena polimerasa –transcriptasa reversa). Consiste en el  análisis del ARN viral. Cada virus tiene una característica genética individual (parecida a las huellas dactilares de cada individuo). Con esta técnica de biología molecular se analiza el material genético (ADN o ARN) mediante la amplificación y comparación con muestras iniciadoras (cebadores o primer), podemos ejemplificar esto como los códigos barra de una etiqueta.

Este ARN del virus se analiza de muestras tomadas de hisopado nasofaríngeo, esputo y lavado bronquial. En el ARN del virus  almacena en forma codificada la información genética del virus. La PCR es una potente técnica de identificación del genoma del virus de la gripe.

Dr. jAIME BENÍTES SOLÍS
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