Pruebas diagn?ticas para influenza

El Diagnóstico de influenza se fundamenta en el Diagnóstico cl?ico (historia Clí­nica y ex?en físico). Las pruebas de laboratorio juegan también un papel importante  en el Diagnóstico y tratamiento. El aislamiento viral o la detección del ant?eno viral en las secreciones respiratorias son las t?nicas de mayor utilidad en la etapa aguda de la enfermedad.

El virus puede ser detectado a través de muestras tomadas  en mucosas  de nariz o garganta (hisopado nasofar?geo), esputo,  por diferentes t?nicas. El Diagnóstico rácido de la infecci? mediante estudio de inmunofluorescencia o identificaci? inmunoenzimédico (ELISA)del ant?eno viral en células epiteliales de las secreciones del tracto respiratorio, no arrojan ninguna información acerca de los subtipos virales. Estos test rácidos tienen una gran utilidad en la atención primaria del paciente, dada por el médico general o por centros que tienen que descartar la enfermedad viral en grandes grupos poblacionales, como está sucediendo en estos momentos.

El uso racional de los test rácidos es de utilidad para iniciar el tratamiento antiviral con inhibidores neuraminidasa, el cual deber? ser instaurado dentro de las primeras 48 horas de iniciado la enfermedad, para que no pierda su eficacia, la cual es disminuir el tiempo de la enfermedad. Ejemplos de estas pruebas son: FLU OIA y QUICKVUE Influenza test son basados en la detección del ant?eno viral usando anticuerpos monoclonal. Ahora hay pruebas más modernas de tercera generaci? ( ZSTATFLU) basado en la detección de la neuraminidasa viral. Otros métodos rácidos (< 30 minutos ) DIRECTIGEN  A, de hisopado de nasofar?geo, far?geo, nasal.  Las pruebas por Inmunofluorescencia demoran entre 2 y 4 horas  y las pruebas por ELISA identificaci? inmunoenziMédica de la enfermedad, mediante la toma de muestras de hisopado nasofar?geo, nasal y lavado bronquial, demoran 2 horas. 

Los Diagnósticos serol?ico (en sangre), son de enorme utilidad desde el punto de vista epidemiológico y mide los t?ulos de anticuerpo inhibidores de la hemaglutininaci?  en sangre(IHA), inmunoanálisis  enzimédico (ELISA), estos t?ulos tienen que estar aumentados 4 veces su valor referencial, no son pruebas r?idas, se positivizan a los  10- 14 d?s (2 semanas).

El cultivo viral de muestras de hisopado nasofar?geo, esputo y lavado bronquial, requiere de un laboratorio especializado y demora una semana (5-10d?s). La lárea celular preferida para el cultivo celular de influenza es la MDCK (Madin Darby Canine Kidney), este medio nutritivo debe contener tripsina. Luego se puede realizar la tipificaci? del virus (determinaci? del subtipo) por análisis antig?ico de su Hemaglutinina HA.

Otro más odo cl?ico de aislamiento del virus es en huevos embrionados de gallina de 9-10 d?s de incubaci?, los virus de la influenza se propagan exitosamente bien en huevos embrionados inoculados en la cavidad amni?ica (por trans iluminaci?)y/o alantoides incubados a 33? C durante 76 a 96 horas.

PCR y LA PCR-RT l (reacci? en cadena polimerasa ?transcriptasa reversa). Consiste en el  análisis del ARN viral. Cada virus tiene una caracter?tica gen?ica individual (parecida a las huellas dactilares de cada individuo). Con esta t?nica de biolog? molecular se analiza el material gen?ico (ADN o ARN) mediante la amplificaci? y comparaci? con muestras iniciadoras (cebadores o primer), podemos ejemplificar esto como los c?igos barra de una etiqueta.

Este ARN del virus se analiza de muestras tomadas de hisopado nasofar?geo, esputo y lavado bronquial. En el ARN del virus  almacena en forma codificada la información gen?ica del virus. La PCR es una potente t?nica de identificaci? del genoma del virus de la gripe.

Dr. jAIME BEN?ES SOL?
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