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Materiales y métodos
Desde febrero del 2006 hasta
octubre del 2007 se analizaron 80 pacientes
con Diagnóstico de cervicitis cRÃoica,
debida a una infecci? con PVH. Los pacientes
presentaban edades que iban desde los 20
hasta los 88 años con una media poblacional
de 39 años. Las muestras fueron cepillados
cervicales enviados por diferentes Servicios
de ginecologÃa de Guayaquil. A partir de la
muestra recibida se procedi?a concentrar las
células y extraer ADN con fenol-cloroformo.
La detección del genotipo
viral fue realizada por PCR ? dot blot
reverso (kit Innolipa-VPH), siguiendo las
indicaciones del fabricante (Tabla 1). El
resultado fue interpretado luego de
verificar los núteros de bandas reactivas
resultantes del proceso de hibridaci?
(figura 1).
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Tabla 1. Condiciones de
amplificaci? y detección de
genotipo por PCR-dot blot
reverso. |
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Figura 1. Interpretaci? de
las bandas reactivas |
?
Ba? maRÃo con agitaci? (Stuart
Scientific)
a 80 r.p.m.
? Equipo Perkin-Elmer 2400 |
Resultados
Se estabilizaron los más
odos referidos anteriormente, y con ello se
constat?que el 100% de nuestras muestras (80
pacientes) fue positiva para VPH.
Los genotipos encontrados
fueron: 6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 53, 56,
66 y 68. De estos genotipos, está asociados
con un alto riesgo de desarrollo de cáncer
cervical las variantes 18, 31, 51, 52, 68 y
59 (gRÃoico 1).
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GRÃoico 1. Prevalencia de
los genotipos de VPH encontrados
en el estudio. |
El 71% de nuestra muestra
present?infecciones más tiples de VPH y, el
93,3% al menos un genotipo viral de alto
riesgo para desarrollo de cáncer cervical
(GRÃoico 2).
Los genotipos más frecuentes
fueron las variantes 6, 11 de bajo riesgo y
52 de alto riesgo (gRÃoico 2).
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GRÃoico 2:
Tipos de infecciones de VPH en
pacientes estudiados. |
Discusi? y Conclusiones
Considerando la frecuencia
del cáncer cervical (51% de todos los
cánceres en ION-SOLCA, Guayaquil) y su
relación con el VPH result?imprescindible
implementar el análisis y tipificaci?
molecular de los genotipos del virus como
más odo para aumentar la eficacia del
control Clínica en pacientes con
infecciones de VPH de alto riesgo.
La PCR es una de las t?nicas
moleculares mas utilizadas debido a que
copia millones de veces, in Vitro, un
segmento de ADN, esta copia exponencial le
da, a esta prueba, un alto nivel de
sensibilidad.
El conocer el genotipo del
virus es un arma fundamental del médico
para tomar las decisiones Clínicas
correctas en los pacientes que poseen
infecci? con virus de alto riesgo. La
detección con PCR dot blot reverso de los
genotipos se torna entonces en una de las
piezas claves de la edificaci? de los
protocolos de control que se tomen con los
pacientes.
Es una t?nica que no requiere
de mayor tiempo, abarata costos en relación a
la secuenciaci? y determina los genotipos de
alto riesgo y de mayor frecuencia en
comparaci? a la captura h?rida que tan solo
determina la presencia o ausencia de
genotipos virales de alto riesgo.
En la población estudiada el
93,3% de los casos presentaron por lo menos
un genotipo de VPH de alto riesgo. La
determinaci? de genotipo no sólo permite
evaluar el riesgo para la paciencia, sino
que ayuda a focalizar los programas de
prevención del cáncer de c?vix y, el
médico adquiere valiosa información para un
adecuado manejo cl?ico de la paciente.
Las infecciones más tiples
con diferentes genotipos de VPH en un mismo
paciente representan un mayor riesgo en el
desarrollo de cáncer cervical, resistencia
al tratamiento y la posibilidad de
reinfecciones subsecuentes4. En nuestra
población, el 80% de casos present? infecci?
con más tiples genotipos.
En cuanto a la prevalencia de
los diferentes tipos de virus, se conoce que
el más frecuente es la variante 16 de alto
grado de malignidad, aunque para nuestra
población las variantes 6, 11 y 52
presentaron un predomino con un 23%, 21% y
19% respectivamente.
Los tres grupos predominantes
(6, 11 y 52) que son de bajo y alto riesgo
respectivamente, implica que dentro del
estudio se pueden constatar las diversas
combinaciones de genotipos que puede
presentar un paciente.
Los datos obtenidos en
nuestro estudio, muestran una tendencia
claramente diferente a lo reportado para
otras poblaciones. La gran cantidad de casos
con infecciones más tiples seRÃo una de
las posibles explicaciones de la alta
incidencia del cáncer de cuello uterino
para nuestra población.
La importancia de estos
resultados radica en el hecho de haber
determinado la presencia de infecciones más
tiples que es un factor de riesgo mayor al
simple genotipo viral, este hecho hace
pensar que es necesario un cambio en las
PolÃticas de control epidemiológico como la
vacuna para VPH, con el fin de disminuir su
incidencia.
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